当前位置:首页 > 用灵芝 > 灵芝作用>

免疫调节作用---《灵芝的现代研究》

关键词:免疫调节作用 灵芝现代研究 免疫调节 免疫作用来源:编辑:野生灵芝网发表:2008-06-01

第二节  免疫调节作用

一、提高机体的非特异性免疫功能
   我们曾观察了从灵芝子实体中提取的灵芝液和灵芝多糖D6对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活力的影响。结果证明,灵芝液和灵芝多糖D6均能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力,吞噬百分率和吞噬指数均较对照组为高。我们还发现,从松杉树芝(铁杉灵芝)子实体和菌丝体中提取的多糖能恢复小鼠因注射氢化可的松而降低的静脉注射的碳粒廓清速率。

顾立刚等(1990)的实验证明,从薄盖灵芝菌丝体提取制成的注射液(简称薄芝液)与小鼠腹腔巨噬细胞在体外培养24h后,在剂量适宜时(5~20μl/ml)可增加巨噬细胞对中性红的吞噬功能,并增加巨噬细胞内溶菌酶的含量。此外,薄芝液还能协同LPS增强巨噬细胞分泌白细胞介素1(IL-1)的能力。

高斌等(1989)亦证明,树舌多糖在体外亦能促使巨噬细胞分泌IL-1样物质。

第二节  免疫调节作用

一、提高机体的非特异性免疫功能
   我们曾观察了从灵芝子实体中提取的灵芝液和灵芝多糖D6对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活力的影响。结果证明,灵芝液和灵芝多糖D6均能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力,吞噬百分率和吞噬指数均较对照组为高。我们还发现,从松杉树芝(铁杉灵芝)子实体和菌丝体中提取的多糖能恢复小鼠因注射氢化可的松而降低的静脉注射的碳粒廓清速率。

顾立刚等(1990)的实验证明,从薄盖灵芝菌丝体提取制成的注射液(简称薄芝液)与小鼠腹腔巨噬细胞在体外培养24h后,在剂量适宜时(5~20μl/ml)可增加巨噬细胞对中性红的吞噬功能,并增加巨噬细胞内溶菌酶的含量。此外,薄芝液还能协同LPS增强巨噬细胞分泌白细胞介素1(IL-1)的能力。

高斌等(1989)亦证明,树舌多糖在体外亦能促使巨噬细胞分泌IL-1样物质。

 

免疫调节作用---摘自书籍:<<灵芝的现代研究>>

 

 

 

二、增强机体体液免疫功能

我们曾以羊红细胞(SRBC)诱导的小鼠空斑形成细胞(PFC)反应为指标,观察几种灵芝多糖对正常小鼠和各种诱因所致免疫功能抑制小鼠的体液免疫功能的影响。灵芝多糖BN3C(5mg/kg)连续腹腔注射5d,能显著促进PFC反应。14月龄小鼠的PFC反应较3月龄小鼠明显降低,灵芝多糖BN3A、BN3B和BN3C(5mg/kg)连续腹腔注射5d可使14月龄小鼠降低的PFC反应明显恢复(表7-1)。

7-1  灵芝多糖BN3A、BN3B和BN3C对14月龄

小鼠空斑形成细胞(PFC)反应的影响

鼠龄

(月)

药物

剂量

mg/(kg·d),ip

PFC×106脾细胞

3

对照

-

2061±309

14

对照

-

864±386+++

14

BN3A

5×5

1957±392***

14

BN3B

5×5

1792±577**

14

BN3C

5×5

1405±336*

x - ±s,n=6,+++P<0.001与3月龄对照比较,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001与14月龄对照比较。

松杉树芝子实体多糖(10~100mg/kg)连续灌胃给药4d可显著增加小鼠抗SRBC PFC数目;在注射环磷酰胺引起免疫功能抑制的小鼠,连续灌胃松杉树芝子实体多糖(100mg/kg,200mg/kg)4d,能使降低的PFC反应部分恢复;强迫小鼠每日在冷水中游泳8~10d,因应激可引起小鼠免疫功能显著降低,如在应激同时给予松杉树芝子实体多糖则可完全对抗应激所致PFC反应降低(表7-2)。从松杉树芝菌丝体和发酵液中所获多糖亦有类似作用。

7-2  松杉树芝子实体多糖对应激所致免疫功能抑制

小鼠的空斑形成细胞(PFC)反应的影响

组别

剂量

mg/(kg·d),ip

鼠数

PFC×106脾细胞

x - ±s

对照

-

7

1222±283

应激对照

-

7

798±121**

松杉树芝多糖+应激

25×8

6

1356±440++

松杉树芝多糖+应激

50×8

6

1396±349++

松杉树芝多糖+应激

100×8

6

1416±518++

**P<0.01与对照组比较,++P<0.01与应激对照组比较。

我们还发现,每日给小鼠腹腔注射灵芝多糖GL-B(25~100mg/kg),共4d,可明显增强小鼠脾细胞对LPS刺激的增殖反应。当GL-B为100mg/kg时,脾细胞增殖反应较对照组增加84.8%。结果表明,GL-B可增强B淋巴细胞对LPS刺激的敏感性。

与多糖成分不同,Kino等(1991)报告,当小鼠用乙肝表面抗原(HBsAg)1μg/只免疫后,第7d开始腹腔注射灵芝蛋白LZ-812mg/kg每周两次,直至第28d可抑制抗HBsAg抗体的产生。

三、增强机体细胞免疫功能

Nakashima等(1979)观察了树舌多糖对细胞免疫反应的影响。给ddy/s小鼠皮下注射甲基化的细胞α-淀粉酶和不完全的Freund's佐剂(M-BaA-IFA)后,仅产生微弱的足爪肿胀反应;但注射甲基化细菌α-淀粉酶和完全的Freund's佐剂(M-BaA-CFA)则引起明显的足爪肿胀反应。预先给小鼠腹腔注射树舌多糖30mg/kg,则能显著增加(M-BaA-IFA)引起的这种迟发型过敏反应,使其反应程度可达M-BaA-CFA所致程度。但剂量增至60 mg/kg时,这种增强作用反减弱。树舌多糖增强M-BaA-IFA诱发的迟发型过敏反应是由于激活非特异性的有扩大细胞免疫反应的T细胞(amplifier T-cells)所致。

我们发现,灌胃松杉树芝多糖(50~200mg/kg)可显著增强二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠迟发型皮肤过敏反应(DCH),拮抗环磷酰胺对DCH的抑制作用。每日强迫小鼠在冷水中游泳5min,共10d,即出现明显的应激性免疫功能抑制,DCH反应可降低50%左右。在应激同时,每日灌胃松杉树芝多糖(50mg/kg,100mg/kg)可使DCH反应维持在接近正常的水平。表明松杉树芝多糖可拮抗应激所致细胞免疫功能抑制。从松杉树芝菌丝体和发酵液中所获多糖亦有类似的增强细胞免疫效应作用。

我们还证明,灵芝多糖BN3A,BN3B和BN3C(1μg/ml,5μg/ml)均可显著促进刀豆素A(ConA)诱导的C57BL/6j小鼠的脾淋巴细胞增殖反应。在浓度为30μg/ml时,BN3A和BN3C还可部分拮抗氢化可的松对淋巴细胞增殖反应的抑制作用。我们还发现,与3月龄小鼠相比,14月龄小鼠的ConA诱导的淋巴细胞增殖反应降低26.5%,此三种多糖在浓度为1和2.5μg/ml时,均可使之显著恢复。最近,我们以同种异型抗原刺激的混合淋巴细胞培养反应(MLR)为模型,观察灵芝多糖GL—B对细胞免疫功能的影响。结果证明,GL—B(50~800μg/ml)可浓度依赖性的促进小鼠的MLR,并可反转小剂量环孢霉素A(0.01μg/ml)对MLR的抑制作用,并使之恢复正常。当环孢霉素A的浓度增至0.1~1μg/ml时,对MLR的抑制作用达80%,对此GL—B几无拮抗作用。GL—B亦可部分拮抗氢化可的松对MLR的抑制作用。抗肿瘤药氟尿嘧啶、丝裂霉素C和阿糖胞苷均可明显抑制MLR,GL—B可剂量依赖性地拮抗这些药物对MLR的抑制作用(表7-3)。同样,我们亦发现,24月龄小鼠的MLR较3月龄小鼠降低35.3%,GL—B可使之恢复(表7-4)。

7-3  灵芝多糖GL—B对丝裂霉素C、氟尿嘧啶和阿糖胞苷

所致混合淋巴细胞反应(MLR)抑制的恢复作用

组别

药物浓度(μg/ml)

[3H]TdR摄取(dpm)

对照

-

31361±4242

丝裂霉素C(抑制对照)

0.01

16842±1266+++

丝裂霉素C+GL-B

0.01+50

19003±978**

丝裂霉素C+GL-B

0.01+100

24209±1505***

丝裂霉素C+GL-B

0.01+200

27606±2372***

对照

-

28946±1527

5-氟尿嘧啶(抑制对照)

0.1

16250±1614+++

5-氟尿嘧啶+GL-B

0.1+50

20875±1750***

5-氟尿嘧啶+GL-B

0.1+100

26201±2130***

5-氟尿嘧啶+GL-B

0.1+200

28823±1728***

对照

-

23678±1348

阿糖胞苷(抑制对照)

0.01

13092±1973+++

阿糖胞苷+GL-B

0.01+50

17658±2420**

阿糖胞苷+GL-B

0.01+100

24380±2949***

阿糖胞苷+GL-B

0.01+200

30030±4649***

x - ±s,n=6,+++P<0.001与对照比较, **P<0.01,***P<0.001与抑制对照比较。

7-4  灵芝多糖GL—B对24月龄老年小鼠的同种

异型抗原刺激的混合淋巴细胞反应(MLR)的影响

组别

鼠龄(月)

浓度(μg/ml)

[3H]TdR摄取×10-3(dpm)

年轻对照

3

-

45.4±2.1

老年对照

24

-

19.4±3.8+++

GL-B

24

50

34.8±4.5

GL-B

24

100

36.1±2.6***

GL-B

24

200

40.2±4.2***

x - ±s,n=6,+++P<0.001与年轻对照比较,**P<0.01,***P<0.001与老年对照比较。

我们还采用抗L3T4及抗Lyt2单克隆抗体和间接荧光免疫法检测了混合淋巴细胞培养中T细胞亚类的数量。结果指出,GL—B(50~200μg/ml)可显著增加其中总T细胞的回收量以及L3T4+细胞和Lyt2+细胞的回收量,Lyt2+细胞的百分比亦明显增加。空斑减少试验还显示,GL—B可显著增强细胞毒T细胞(CTL)的功能,在浓度为200μg/ml时,其杀伤活性增加100%。小鼠L3T4+细胞属于T辅助细胞(Th),这一结果说明,GL—B能促使Th细胞增殖。而T抑制细胞(Ts)和CTL均带有Lyt2+抗原,故GL—B促进Lyt2+细胞增殖的确切含义尚待研究,但由于我们又观察到GL—B可增强CTL的杀伤活性,表明GL—B增加的Lyt2+细胞中,至少有一部分属于CTL细胞。

体外试验亦证明,树舌多糖可增强ConA刺激的小鼠脾细胞增殖反应。薄芝液对ConA刺激的脾细胞增殖反应的影响视所用浓度而异,低浓度(1.5μg/ml)时有促进作用,高浓度(25μg/ml)则抑制之。

灵芝蛋白LZ—8在体外对小鼠脾细胞有强大的促有丝分裂作用,最适刺激浓度为3.3μg/ml。LZ—8尚可增强ConA和LPS的促有丝分裂作用。

 

四、促进免疫细胞因子的产生

我们发现,灵芝多糖BN3A,BN3B和BN3C(0.05~1μg/ml)均可显著增加C57BL/6j小鼠脾细胞在ConA存在条件下的IL—2产生,并可部分地拮抗环孢霉素A和氢化可的松对小鼠脾细胞产生IL—2的抑制作用。与3月龄小鼠比较,19月龄小鼠脾细胞IL—2产生减少17.6%~20.3%,此三种多糖均可使之恢复至3月龄小鼠的正常水平。

在混合淋巴细胞培养中,T辅助细胞(Th)受到同种异型抗原刺激后,在巨噬细胞分泌的IL—1协同下,发生增殖反应并合成分泌IL—2。在反应体系中加入终浓度为200μg/ml的GL—B,其作用呈双向反应。即在培养的前24h,GL—B可促进脾细胞合成分泌IL—2,24h以后则逐渐减少合成分泌IL—2。当固定培养时间为12h,改变GL—B的浓度,则可见GL—B呈浓度依赖性地促进脾细胞合成分泌IL—2(表7-5)。由于GL—B对IL—2依赖株HT2细胞以及同种异型抗原或ConA活化的脾细胞均无促增殖作用,故我们认为GL—B不能促进活化细胞的IL—2受体表达。

7-5  灵芝多糖GL—B对小鼠混合淋巴细胞培养上清液

中白细胞介素质2(IL—2)活性的影响

组别

浓度(μg/ml)

IL-2活性(dpm)

对照

-

2044±167

GL-B

25

2386±208*

GL-B

50

2930±125***

GL-B

100

3044±192***

GL-B

200

3607±339***

x - ±s,n=6,*P<0.05, ***P<0.001与对照比较。

最近,我们证实,未纯化的小鼠脾细胞在体外培养时可发生自发性增殖,即自身混合淋巴细胞培养反应(A MLR),GL—B亦可显著促进这种反应。而更为有意义的是,24月龄老年小鼠的未纯化脾细胞的自发性增殖和IL—2分泌均较3月龄年轻小鼠显著减少,而GL—B则可剂量依赖性地使之逐渐恢复(表7-6)。

7-6  灵芝多糖GL—B对老年小鼠脾细胞自发增殖和

白细胞介素质2(IL—2)产生的影响

组别

鼠龄

(月)

浓度

(μg/ml)

[3H]TdR摄取×10-3

dpm)

IL-2活性×10-3

dpm)

年轻对照

3

-

24.8±4.7

8.3±1.4

老年对照

24

-

18.0±3.4+

5.8±1.0+

GL-B

24

50

22.1±2.7*

7.3±1.2*

GL-B

24

100

24.9±3.8**

8.2±1.0**

GL-B

24

200

26.4±2.4***

9.0±1.0***

x - ±s,n=6,+P<0.001与年轻对照比较,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001与老年对照比较。

我们还发现,GL—B与小鼠腹腔渗出细胞(主要为巨噬细胞)共同培养24h后,上清液和腹腔渗出细胞内IL—1明显增加,说明GL—B可促进腹腔渗出细胞合成和分泌IL—1(表7-7)。

7-7  灵芝多糖GL—B对小鼠腹腔渗出细胞合成和分泌

白细胞介素质1(IL—1)的影响

组别

浓度

(μg/ml)

IL-1活性(dpm)

上清液

细胞内

对照

-

9328±752

17805±1893

GL-B

50

12290±1176***

18641±2042

GL-B

100

15046±1645***

20908±2122*

GL-B

200

16759±2786***

23218±1530***

 

x - ±s,n=6,*P<0.05,***P<0.001与对照比较。

最近,我们用Northern印迹转移杂交法观察GL—B对小鼠脾细胞内细胞因子和原癌基因mRNA表达的影响。结果证明,给小鼠灌胃GL—B(100mg/ml)7d,可明显促进脾细胞中细胞因子IL—2、IL—6、肿瘤坏死因(TNF)和原癌基因C-myc的mRNA表达,使表达量增加(表7-8)。这一结果在分子水平进一步证实了灵芝多糖的免疫调节作用。

7-8  GL—B对小鼠脾细胞中IL—2、IL—6、TNF和

C-myc mRNA表达的影响

观察指标

组别

剂量(mg/kg, ig×d)

mRNA水平(%)

IL-2

对照

-

100.00±1.45

GL-B

100×7

166.69±7.26***

IL-6

对照

-

100.00±12.28

GL-B

100×7

195.36±69.40*

TNF

对照

-

100.00±16.95

GL-B

100×7

183.09±7.82***

C-myc

对照

-

100.00±7.58

GL-B

100×7

149.50±27.43*

x - ±s,n=4,*P<0.05,***P<0.001与对照组比较。

树舌多糖(20mg/kg),皮下注射可提高荷瘤小鼠脾细胞产生IL—2和干扰素的能力。

薄芝液对ConA诱导的小鼠脾细胞IL—2的产生呈现双向作用,小剂量(1.5μg/ml)促进,大剂量(25μg/ml)抑制。

支持本站请:

小提示:按 回车[Enter]键 返回,按 ←键 返回上一页, 按 →键 进入下一页。

上一篇:增强淋巴细胞的DNA多聚酶α活性--灵芝现代研究(图文)

下一篇:灵芝的药理作用:抗肿瘤作用(图文)

本站推荐:   更多推荐

本站热点

推荐资讯

本月排行

本站业余"砖业"研究/了解/收集野生灵芝的相关资料,只供大家参考!建议择其善者而从之!湘ICP备08004400号

灵芝商城提供来自民间的纯正天然的野生灵芝,灵芝中药配伍使用请询证中医师,遵医嘱!

网站地图 站点帮助: 电话(fax):0731-55687584 手机号:18973250271 微信号:13217325584 QQ:714254644 qq留言

Copyright@2005-2065 野生灵芝网 移动端网址:m.yslz.org All rights reserved.

顶部导航
 
友荐云推荐